腫瘤基因診斷對(duì)于腫瘤的精準(zhǔn)治療至關(guān)重要，而高質(zhì)量的核酸提取是確保基因診斷準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)。通過對(duì)不同類型腫瘤樣本（新鮮組織、FFPE樣本及血漿ctDNA）的提取實(shí)驗(yàn)，對(duì)比傳統(tǒng)酚氯仿法，分析博清生物核酸提取儀在核酸得率、純度及下游應(yīng)用兼容性等方面的表現(xiàn)。結(jié)果顯示，博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在各方面均展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢(shì)，尤其適用于臨床腫瘤基因診斷的高通量、高質(zhì)量需求，為腫瘤精準(zhǔn)醫(yī)療提供了有力的技術(shù)支持。

腫瘤的發(fā)生發(fā)展與基因變異密切相關(guān)，腫瘤基因診斷能夠?yàn)榕R床治療提供關(guān)鍵的指導(dǎo)信息，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)醫(yī)療。核酸提取作為腫瘤基因診斷流程的起始和關(guān)鍵步驟，其提取質(zhì)量直接影響后續(xù)基因檢測(cè)的準(zhǔn)確性與可靠性。傳統(tǒng)的核酸提取方法如酚氯仿法，雖應(yīng)用歷史較長，但存在操作繁瑣、耗時(shí)長、易引入污染以及對(duì)操作人員技能要求高等缺點(diǎn)，難以滿足現(xiàn)代臨床腫瘤基因診斷快速、高通量且準(zhǔn)確的需求。

隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，基于磁珠法的自動(dòng)化核酸提取技術(shù)逐漸成為主流。磁珠法利用磁珠表面的特殊官能團(tuán)與核酸分子特異性結(jié)合，在磁場(chǎng)作用下實(shí)現(xiàn)核酸的分離與純化，具有操作簡便、自動(dòng)化程度高、提取效率高以及交叉污染風(fēng)險(xiǎn)低等顯著優(yōu)勢(shì)。博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀正是采用了先進(jìn)的磁珠吸附分離技術(shù)，能夠高效處理多種樣本類型，包括腫瘤組織、FFPE（福爾馬林固定石蠟包埋）樣本以及血漿中的循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）等。本研究通過一系列實(shí)驗(yàn)，系統(tǒng)評(píng)估博清生物核酸提取儀在腫瘤基因診斷中的實(shí)際應(yīng)用性能，為其在臨床實(shí)踐中的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

一、材料與方法

（一）儀器設(shè)備

博清生物核酸提取儀：型號(hào)BHT-16T，博清生物科技（南京）有限公司產(chǎn)品。該儀器采用磁珠吸附分離技術(shù)，具備精準(zhǔn)的溫度控制模塊，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化核酸提取流程，一次最多可處理16個(gè)樣本。

傳統(tǒng)核酸提取相關(guān)設(shè)備：包括高速離心機(jī)用于酚氯仿法中的離心步驟；移液器用于精確移取試劑和樣本；渦旋振蕩器用于混合樣本與試劑。

核酸定量與檢測(cè)儀器：熒光計(jì)用于精確測(cè)定核酸濃度；分光光度計(jì)用于檢測(cè)核酸純度，通過測(cè)量吸光度計(jì)算A260/A280和A260/A230比值；熒光定量PCR儀用于評(píng)估提取核酸的下游PCR擴(kuò)增性能。

（二）樣本來源

新鮮腫瘤組織樣本：共收集30例，均來自手術(shù)切除的腫瘤患者，樣本類型涵蓋肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌等常見腫瘤類型。在手術(shù)切除后立即將組織樣本置于液氮中速凍，并保存于-80℃冰箱直至實(shí)驗(yàn)使用。

FFPE樣本：選取20例已存檔的FFPE樣本，同樣涉及多種腫瘤類型。

血漿ctDNA樣本：采集15例腫瘤患者的外周血樣本，通過EDTA抗凝管收集。血液樣本采集后2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行離心處理，分離出血漿，并進(jìn)一步通過專用試劑盒富集血漿中的ctDNA。

（三）試劑耗材

核酸提取試劑盒：配套博清生物核酸提取儀使用，包含磁珠、裂解液、洗滌液、洗脫液等完整試劑體系，適用于多種樣本類型的核酸提取。

酚氯仿法試劑：包括酚氯仿異戊醇混合液（25:24:1）、無水乙醇、75%乙醇、3M醋酸鈉（pH 5.2）、RNase A等，均為分析純級(jí)別。

其他試劑：Qubit dsDNA HS Assay Kit 用于熒光計(jì)對(duì)DNA濃度的測(cè)定；實(shí)時(shí)熒光定量PCR所需的Master Mix、引物及探針，針對(duì)腫瘤相關(guān)基因進(jìn)行定制合成。

二、核酸提取儀技術(shù)優(yōu)勢(shì)分析

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀采用的磁珠吸附分離技術(shù)具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在新鮮腫瘤組織樣本提取中，精準(zhǔn)的溫度控制模塊能夠在裂解階段確保細(xì)胞充分裂解，同時(shí)避免核酸過度降解；在洗滌步驟中，通過優(yōu)化磁珠與核酸的結(jié)合條件以及洗滌液的配方，能夠高效去除雜質(zhì)，提高核酸純度和得率。對(duì)于FFPE樣本，其專門設(shè)計(jì)的脫蠟和裂解程序，能夠有效打破核酸與蛋白質(zhì)之間的交聯(lián)，使核酸充分釋放，從而顯著提高FFPE樣本的核酸提取效率。在血漿ctDNA 提取方面，博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀利用磁珠對(duì)ctDNA的特異性吸附，結(jié)合自動(dòng)化的洗滌和洗脫流程，大大提高了ctDNA的回收率和純度，減少了操作過程中的人為誤差和樣本損失。

三、研究局限性與展望

本研究雖然系統(tǒng)評(píng)估了博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在腫瘤基因診斷中的性能，但仍存在一定局限性。例如，實(shí)驗(yàn)樣本主要集中在常見腫瘤類型，對(duì)于一些罕見腫瘤類型的適用性還需進(jìn)一步驗(yàn)證；在通量方面，目前該儀器一次最多處理16 樣本，在大規(guī)模篩查中可能稍顯不足。未來，可進(jìn)一步擴(kuò)大樣本類型和數(shù)量，深入研究博清生物核酸提取儀在不同腫瘤類型及復(fù)雜臨床樣本中的應(yīng)用效果。同時(shí)，研發(fā)團(tuán)隊(duì)可考慮通過技術(shù)升級(jí)，如增加模塊或改進(jìn)儀器設(shè)計(jì)，提高儀器的通量，以更好地滿足臨床大規(guī)模檢測(cè)的需求。此外，結(jié)合新興的分子診斷技術(shù)，如數(shù)字PCR、二代測(cè)序等，進(jìn)一步優(yōu)化核酸提取流程，提高檢測(cè)的精準(zhǔn)度和全面性，為腫瘤基因診斷提供更完善的解決方案。

通過對(duì)新鮮腫瘤組織樣本、FFPE樣本及血漿ctDNA 樣本的提取實(shí)驗(yàn)，全面評(píng)估了博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在腫瘤基因診斷中的性能。結(jié)果表明，博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在核酸得率、純度及下游應(yīng)用兼容性等方面均顯著優(yōu)于傳統(tǒng)酚氯仿法。該儀器在腫瘤基因診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。