藥物濃度監(jiān)測在臨床治療和藥物研發(fā)中至關(guān)重要，其準確性直接影響治療效果和安全性。傳統(tǒng)方法如高效液相色譜（HPLC）和質(zhì)譜（MS）雖準確性高，但存在設備昂貴、操作復雜、耗時較長等缺點。免疫分析法（如ELISA）雖快速，但特異性受交叉反應影響。因此，開發(fā)一種快速、靈敏且操作簡便的檢測技術(shù)具有重要意義。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的熒光計采用熒光檢測原理，適配Qubit系列試劑，支持dsDNA、ssDNA、RNA及蛋白質(zhì)的特異性檢測，檢測靈敏度高（dsDNA低至0.01ng/μL），樣本量僅需1-20μL。本研究旨在探索其在藥物濃度監(jiān)測中的應用。

一、材料與方法

（一）儀器與試劑

1、儀器：博清生物熒光計（適配Qubit系列試劑）、HPLC系統(tǒng)（用于對比）。

2、試劑：磺胺類抗生素標準品、環(huán)孢素標準品、Qubit熒光定量試劑盒、熒光免疫層析試紙條。

（二）樣本制備

1、抗生素檢測：將動物組織勻漿后，采用乙腈提取磺胺類抗生素，離心后取上清液。

2、免疫抑制劑檢測：采集患者全血，分離血漿后直接使用。

（三）檢測方法

1、熒光免疫法：將藥物特異性熒光標記抗體與樣本混合，通過博清生物熒光計檢測熒光強度，計算藥物濃度。

2、HPLC法：采用C18色譜柱，流動相為乙腈-水（60:40，v/v），檢測波長254nm。

（四）數(shù)據(jù)分析

通過標準曲線計算藥物濃度，并比較兩種方法的線性范圍、檢測限及重復性。

二、結(jié)果與討論

（一）檢測性能評估

1、線性范圍與檢測限：磺胺類抗生素在5-50μg/kg 范圍內(nèi)線性良好（R2>0.99），檢測限為0.5μg/kg；環(huán)孢素在10-200ng/mL 范圍內(nèi)線性良好（R2>0.99），檢測限為5ng/mL。博清生物熒光計的檢測限顯著低于HPLC（磺胺類HPLC檢測限為2μg/kg，環(huán)孢素為10ng/mL）。

2、重復性：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<3%，批間CV<5%，顯示良好的精密度。

（二）與傳統(tǒng)方法的比較

1、檢測速度：博清生物熒光計單次檢測<10秒，而HPLC需30分鐘以上。

2、樣本需求：熒光計僅需1-20μL樣本，HPLC需100μL以上。

3、抗干擾能力：熒光計通過特異性熒光標記抗體排除基質(zhì)干擾，而HPLC需復雜樣本前處理。

（三）臨床應用潛力

在模擬臨床樣本檢測中，博清生物熒光計對環(huán)孢素的檢測結(jié)果與HPLC具有良好的相關(guān)性（R2=0.98），且操作更簡便，適合床旁檢測（POCT）。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的熒光計在藥物濃度監(jiān)測中表現(xiàn)出快速、高靈敏度、操作簡便等優(yōu)勢，尤其適用于抗生素和免疫抑制劑的檢測。其性能優(yōu)于傳統(tǒng)方法，具有廣闊的臨床應用前景。未來可進一步探索其在多藥物聯(lián)合檢測和自動化集成中的潛力。

未來研究可進一步優(yōu)化熒光標記技術(shù)，提高檢測通量（如多通道設計），并開展臨床樣本驗證，以推動博清生物熒光計在藥物濃度監(jiān)測中的廣泛應用。此外，結(jié)合人工智能算法進行數(shù)據(jù)分析，有望進一步提升檢測準確性和效率。