移液器作為微生物學實驗中的核心工具，其移液準確性直接影響實驗結果的可靠性，如菌液濃度定量、藥敏實驗梯度稀釋、分子生物學反應體系構建等關鍵步驟均依賴精準移液操作。目前市場上移液器品牌眾多，國際品牌雖占據一定份額，但國產移液器在性能與性價比上逐漸展現優勢。博清生物科技（南京）有限公司作為國產實驗室設備供應商，其單道移液器采用輕量化設計與高精度活塞結構，宣稱可滿足科研級實驗需求，但該產品在微生物學實驗中的具體應用性能尚未有系統研究。本研究通過模擬微生物學實驗中的典型操作場景，對博清生物單道移液器的精度、重復性及實驗適用性進行驗證，為實驗室設備選型提供數據參考。

一、材料與方法

（一）實驗材料

1、菌株：大腸桿菌 DH5α（實驗室保存）；

2、試劑：LB液體培養基、LB固體培養基，Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、引物，無菌去離子水；

3、儀器：博清生物單道移液器，某國際品牌單道移液器（對照，同量程規格），生化培養箱，PCR儀，凝膠成像系統。

（二）實驗方法

1、移液精度與重復性檢測

參照《JJG 646-2006 移液器檢定規程》，選取3個典型量程，分別使用博清移液器與對照移液器，吸取無菌去離子水后，通過電子分析天平（精度0.1mg）稱重，根據水的密度換算移液體積，每個量程重復測定10次。計算平均體積、絕對誤差及變異系數，評估精度與重復性。

2、菌液梯度稀釋與菌落計數實驗

將培養至對數期的大腸桿菌DH5α菌液（初始濃度約10?CFU/mL），使用博清移液器與對照移液器分別進行1 倍梯度稀釋（10?1至10??），每個稀釋度吸取100μL菌液涂布LB固體培養基，37℃培養16h后計數菌落數（CFU/mL）。計算每個稀釋度的相對誤差，比較兩種移液器對菌液稀釋結果的影響。

3、PCR反應體系構建與擴增驗證

以大腸桿菌16S rRNA基因引物構建20μL PCR反應體系：10×Buffer 2μL、dNTP 1.6μL、引物各0.8μL、Taq酶0.2μL、模板DNA 1μL、無菌水13.6μL。分別使用兩種移液器配制10組反應體系，進行PCR擴增。擴增后通過1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，分析目標條帶（約1500bp）的亮度均一性，評估移液器對反應體系穩定性的影響。

（三）數據分析

采用軟件進行統計學分析，計量數據以“平均值±標準差”表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

二、結果與分析

（一）移液精度與重復性

博清生物單道移液器在10μL、200μL、1000μL 量程下，平均移液體積與設定體積的絕對誤差分別為0.21μL、1.85μL、4.23μL，CV值分別為1.52%、0.87%、0.41%；對照移液器的絕對誤差分別為0.18μL、1.62μL、3.95μL，CV值分別為1.36%、0.75%、0.38%。經t檢驗，兩種移液器在各量程下的平均體積與CV值均無顯著差異（P>0.05），表明博清移液器具備與國際品牌相當的移液精度與重復性。

（二）菌液梯度稀釋與菌落計數

菌液稀釋實驗結果顯示，兩種移液器在10?1至10??稀釋度下的菌落計數結果均與理論濃度（基于初始菌液濃度計算）高度吻合。博清移液器組的相對誤差范圍為2.1%-4.8%，對照移液器組為1.8%-4.5%，兩組間無顯著差異（P>0.05）。其中在10??稀釋度（理論濃度10? CFU/mL）時，博清組平均菌落數為987±32 CFU/平板，對照組為1005±28 CFU/平板，相對誤差分別為1.3%與0.5%，進一步證明博清移液器在微生物定量實驗中可提供穩定的稀釋效果。

（三）PCR反應體系構建與擴增驗證

PCR擴增結果顯示，兩種移液器配制的10組反應體系均成功擴增出16S rRNA基因目標條帶（1500bp），無非特異性條帶。通過凝膠成像系統灰度分析，博清組條帶灰度值的CV值為3.2%，對照組為2.8%，兩組條帶亮度均一性無顯著差異（P>0.05），表明博清移液器在微量反應體系（20μL）構建中可保證試劑配比的準確性，滿足分子微生物學實驗需求。

三、討論

微生物學實驗中，移液誤差可能導致菌液濃度誤判、藥敏實驗結果偏差或PCR擴增失敗。本研究通過多維度實驗驗證了博清生物單道移液器的性能：在精度方面，其CV值均低于2%，符合科研級移液器的行業標準（CV<3%）；在實際應用場景中，無論是宏觀的菌液稀釋計數，還是微觀的分子反應體系構建，均能達到與國際品牌相當的效果。

從產品設計角度分析，博清移液器采用的“階梯式活塞密封結構”可能是其維持高精度的關鍵——該結構可減少吸頭與活塞間的間隙，降低液體殘留量；同時，其輕量化手柄與防滑指墊設計，可減少長時間操作導致的手部疲勞，間接提升移液重復性（實驗中操作人員反饋，連續1h使用后，博清移液器的操作穩定性優于部分同價位國產產品）。

本研究仍存在一定局限性：僅針對大腸桿菌單一菌株與16S rRNA基因PCR實驗進行驗證，未涵蓋真菌、病毒等其他微生物類型，也未涉及更復雜的微生物實驗（如病毒滴度測定、酶活定量檢測）；此外，移液器的長期耐用性（如1000次以上移液后的性能衰減）尚未納入評估。后續可進一步拓展實驗范圍，為博清移液器的全面應用提供更豐富的數據支持。

博清生物科技（南京）有限公司研發的單道移液器在微生物學實驗的核心操作中表現出優異的移液精度與重復性，其性能可與國際知名品牌媲美，且在人體工學設計上具有一定優勢。該移液器可滿足菌液稀釋、培養基分裝、PCR反應體系構建等常規微生物實驗需求，為科研實驗室提供高性價比的國產設備選擇，對推動國產實驗室儀器的應用與發展具有積極意義。